Анализ крови на иппп: зачем нужен и что показывает

Анализ методом ПЦР

ПЦР анализ — что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

• инфекционный мононуклеоз;
• ВИЧ;
• цитомегаловирусную инфекцию;
• вирусные гепатиты G, C, B, A;
• инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
• герпетическую инфекцию;
• онкогенные вирусы;
• листериоз;
• хеликобактерную инфекцию;
• клещевой энцефалит, боррелиоз;
• туберкулез;
• кандидоз.

Крови

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

Мазка

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины. Для проведения анализа могут быть взяты разные биологические жидкости: слюна, мокрота, моча, кровь. В гинекологии для точности определения чаще используется мазок со слизистой влагалища из цервикального канала.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

• беременность, которая протекает тяжело;
• острая фаза ИППП;
• если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
• поиск причин бесплодия.

Кала­

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

• за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
• исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

1. Анализ способен указывать на ДНК паразита, другие же тесты могут определять только остатки их жизнедеятельности.
2. Высокая точность, будет установлен возбудитель.
3. Ультрачувствительный анализ, который способен выявить даже одну клетку вируса.
4. Результат исследования ПЦР будет готов через 4-5 часов.

Мочи

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

• минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
• за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
• сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
• брать нужно первую утреннюю порцию материала.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки. которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

• при ВИЧ
• при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
• при лечении аутоиммунных заболеваний
• в период выздоровления после тяжёлой болезни
• при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Покажет ли ЗППП мазок на флору?

Мазок на флору – базовое исследование, которое назначается всем пациентам, обратившимся к венерологу с жалобами со стороны урогенитального тракта.

Это самое простое, быстрое и недорогое исследование.

Отталкиваясь от его результатов, врач планирует дальнейший объем диагностических мероприятий.

Кроме того, уже при исследовании мазка на флору возможно обнаружение некоторых половых инфекций:

1. Трихомониаз.

Выявляется преимущественно у женщин.

Трихомонады могут быть обнаружены в вагинальном мазке.

Исследуется обязательно нативный мазок (не окрашенный).

Потому что важно выявить живые трихомонады. Только их обнаружение в живом виде (подвижные клетки) может быть основанием для установления соответствующего диагноза

Только их обнаружение в живом виде (подвижные клетки) может быть основанием для установления соответствующего диагноза.

Трихомонады – это простейшие жгутиковые микроорганизмы.

Они способны к активным движениям.

При микроскопии врач видит крупные клетки с жгутиками, которые совершают толчкообразные движения.

Факторы, повышающие вероятность обнаружения трихомонад у лиц, страдающих трихомониазом:

• женский пол;
• материал взят из влагалища;
• острая форма инфекции с большим количеством выделений и выраженной симптоматикой.

Факторы, снижающие чувствительность теста:

• мужской пол;
• мазок взят из уретры или цервикального канала;
• слабо выраженные или отсутствующие симптомы.

1. Гонорея.

Чаще обнаруживается у мужчин.

Болезнь вызывают гонококки – шаровидные бактерии рода Нейссерия.

Они выявляются в мазке, окрашенном по Граму.

Для установления диагноза врач должен обнаружить три критерия одновременно:

• кокковые бактерии, располагающиеся парами, имеющие форму кофейных зерен;
• часть этих бактерий расположены внутри клеток;
• по Граму они окрашиваются отрицательно (в розовый цвет).

При отсутствии хотя бы одного критерия диагноз не может быть установлен микроскопически.

В таком случае требуется его подтверждение другими методами (посев, ПЦР).

Это связано с тем, что в урогенитальном тракте могут присутствовать другие бактерии рода Нейссерия.

Это сапрофитные микроорганизмы, которые не вызывают воспалительных процессов.

Факторы, повышающие вероятность обнаружения гонококков у лиц, страдающих гонореей:

• свежая форма заболевания с выраженными симптомами;
• мазок берется из уретры;
• мужской пол пациента.

Факторы, снижающие вероятность выявления гонореи:

• женский пол;
• вагинальный или цервикальный мазок (на основании исследования орофарингеальных или анальных мазков диагноз не может быть установлен вообще);
• хроническое течение заболевания со слабо выраженной симптоматикой, скудными или отсутствующими выделениями.

1. Кандидоз.

Может быть диагностирован у пациентов обоих полов.

В мазке врач выявляет почкующиеся клетки и псевдомицелий.

Их обнаружение является достаточным основанием для установления диагноза.

Дополнительные исследования не требуются.

Если это впервые выявленный кандидоз с нетяжелым клиническим течением, то доктор сразу после обнаружения грибков может приступать к лечению пациента.

На что не берут мазок из ЗППП

Некоторые инфекции, которые передаются половым путем, выявляются не в мазке.

Основным материалом для исследования может быть кровь. Это особенность диагностики тех инфекций, которые проникают в организм через половые органы, но надолго в них не задерживаются. Они распространяются по всему организму.

Речь идет о таких инфекциях:

• ВИЧ
• вирусные гепатиты
• цитомегаловирус
• вирус Эпштейна-Барр

Также не всегда можно взять мазки на сифилис. Это возможно, только если имеют место внешние проявления инфекции.

В первичном периоде мазок можно взять из шанкра.

Во вторичном – из элементов сыпи.

Но зачастую их не берут. Вместо этого проводят анализ крови на антитела. Серологические исследования остаются основным методом диагностики сифилиса.

Что это?

Скрытые инфекции вызываются либо патогенными, либо условно-патогенными микроорганизмами. Первые проникают в организм разными путями (как правило, половым) и начинают размножаться, вызывая характерные симптомы. Условно-патогенные возбудители всегда присутствуют в тканях человека, но начинают проявлять активность при определённых условиях, к примеру, при сниженном иммунитете.

Скрытые половые инфекции. Видео от известного доктора!

Почему инфекции именуются скрытыми? Потому что они способны долгое время присутствовать в организме и не давать знать о себе, а потом вызывать характерные симптомы. Период носительства, длящийся от заражения до первых проявлений, бывает продолжительным, достигающим нескольких месяцев или лет.

Откуда берут мазок на ЗППП у мужчин

У представителей мужского пола мазок чаще всего берут из уретры.

Это трубка, через которую проходит моча и эякулят.

Техника забора мазков может быть разной. Всё зависит от цели исследования. Для микроскопии достаточно взять отделяемое уретры.

Для ПЦР нужны эпителиальные клетки. При заборе мазков для бактериоскопической диагностики используют бактериологическую петлю или ватный тампон.

Бактериологическую петлю погружают на 2 см. Затем её прижимают к стенке уретры и извлекают. Может использоваться и ватный тампон. Доктор вводит его несколько глубже – на 3-4 см.

Затем выполняет вращательные движения. После получения биологического материала он обычно сразу наносится на предметное стекло.

Мазок для ПЦР берут специальным зондом. Он выглядит как «ёршик». Он позволяет сделать соскоб эпителия уретры. Это необходимо для выявления возбудителей ЗППП, которые паразитируют внутриклеточно.

Зонд вводят в мочеиспускательный канал. Им совершаются вращательные движения. Он извлекается и погружается в пробирку с транспортной средой.

Затем её отправляют в лабораторию на анализ. Мазки также берутся с поверхности высыпаний. Это возможно при подозрении на сифилис, кандидоз, герпес. Элементы сыпи содержат бактериальные, грибковые клетки или вирусы.

Значительно реже у мужчин берут мазок из:

• глаз
• горла
• ануса

Исследуются такие мазки преимущественно методом ПЦР. Или проводится их бак посев.

Бактериоскопическое исследование тоже проводится. Но оно менее эффективно.

Во рту и прямой кишке живет немало бактерий, с которыми можно перепутать возбудителей ЗППП.

У мужчин мазки из других участков тела, помимо уретры, берут при наличии особых показаний. То есть, если есть указания на то, что у пациента может быть инфекция во рту или прямой кишке.

Такими указаниями могут быть либо симптомы, либо данные анамнеза. Подобны мазки берут, если мужчина отмечает, что у него был анальный секс (гомосексуалисты) или оральный с потенциальным источником инфекции.

Как подготовиться к сдаче анализов

Чтобы сдать кровь на ИППП, специфической подготовки не требуется. Тем не менее, для повышения точности результатов рекомендуется придерживаться следующих правил:

• Сдавать кровь желательно утром натощак. Перед этим допускается употребление небольшого количества негазированной воды.
• Исключить из рациона алкоголь и копчености за сутки до сдачи крови.
• Прекратить прием антибиотиков и других лекарственных препаратов за сутки до сдачи крови. При невозможности сделать это сообщить врачу о том, какие лекарства были приняты в течение суток и в каком количестве.

Диагностика крови на ИППП проводится путем исследований материалов под микроскопом, а также с применением науки о генах. Также некоторые специалисты не рекомендуют накануне забора анализов претерпевать значительные физические и эмоциональные нагрузки.

Разновидности ПЦР-анализов

Вариаций такой ПЦР диагностики существует много. Выбор определенного метода зависит от многих факторов: предположительного диагноза, возможностей доступных лабораторий, метода взятия материала и пр.

Наиболее часто используются такие разновидности ПЦР:

• вложенная;
• ступенчатая;
• с горячим стартом;
• виртуальная;
• ассиметричная;
• в реальном времени и т. д.

Преимущественно используют ПЦР в реальном времени, так как способ характеризуется самыми точными результатами и максимальной скоростью обработки данных. После его применения заключение готово через час-два.

Если врач выдает направление на обследование с применением полимеразной цепной реакции, то он должен уточнить, какой именно биоматериал необходимо предоставить пациенту и каким образом подготовиться к отбору пробы.

Анализ крови

Кровь в качестве биоматериала для тестирования берут при подозрении на ВИЧ, вирусный гепатит, токсоплазмы, половой герпес и цитомегалию. Для большинства этих патогенов до использования этого метода диагностика базировалась на выявлении антител к возбудителю, что сильно затягивало время обнаружения микробов в тот период, когда антитела еще не вырабатываются.

Перед сдачей крови для диагностики в данном случае не нужны особые приготовления, но лучше, если проба будет отобрана натощак. Единственное обстоятельство, способное серьезно исказить результаты — прием антибиотиков, поэтому сдаче должен предшествовать временной отрезок после приема подобных лекарств в несколько дней или недель в зависимости от типа антибиотика.

В самых современных клиниках в последнее время для отбора крови на ПЦР используют вакуумные системы, которые минимально повреждают кожные покровы и сводят к минимуму вероятность попадания в пробу загрязняющих агентов из воздуха, инструментов или рук лаборантов.

Анализ мазка

Используется как в гинекологии, так и в венерологии для определения заболеваний, передающихся половым путем. Часто назначают ПЦР мазка во время беременности для выявления скрытых факторов, способных негативно повлиять на формирование плода или ход беременности.

Подготовка к отбору материала заключается в том, чтобы полностью исключить половые контакты за несколько суток до процедуры. Проводить спринцевания марганцовкой или настоями трав тоже нельзя. На протяжении критических дней и 2-х дней после них мазок на ПЦР-анализ не берется.

Отбор биоматериала производят в лаборатории из влагалища, шейки матки, цервикального канала или уретры.

ПЦР-анализ мазка позволяет выявить патоген, который устойчив к определенному виду антибиотиков. Кроме того, показаниями к такому виду диагностического обследования выступают:

• осложненная беременность без видимых причин;
• острое течение венерической болезни;
• предположительное хроническое течение венерического заболевания;
• выявление причин бесплодия или самопроизвольных абортов.

Анализ кала

Анализ кала с применением полимеразной цепной реакции назначается специалистом для уточнения наличия инфекции. Подготовка к отбору пробы кала для ПЦР заключается в следующем:

• исключить за несколько суток слабительные средства в виде любых свечей, масел или оральных медикаментов;
• не употреблять накануне лекарства или продукты, которые придают калу выраженную окраску.

Материал для ПЦР-определения лучше всего доставить в специальном контейнере для кала с палочкой. Внутреннее пространство контейнера стерильно, поэтому протирать или промывать его не следует

Во время отбора образца важно отслеживать, чтобы не задеть внутреннюю поверхность приемника, также в пробе не должно быть следов мочи. Перед отбором запрещено применение клизм

Анализ мочи

Такое исследование с помощью ПЦР позволяет извлечь ДНК образец вируса или бактерии. Забор мочи лучше проводить утром натощак. Лучше всего, если это будет происходить непосредственно в лаборатории.

Обязательные условия подготовки для получения результатов исследования мочи в лаборатории полимеразной цепной реакции:

• выдержать 3 недели после приема антибиотиков;
• перед отбором жидкости не пить и не есть;
• запрет вагинального секса за сутки до сдачи пробы;
• в контейнер нужно поместить первую порцию материала после пробуждения.

ПЦР диагностика инфекций

Мазок ПЦР у женщин, что это такое, для чего берется и по каким правилам? Данное исследование позволяет очень точно выявить возбудителей различных инфекций и виновников воспалительных процессов (вульвовагинитов). Берется ПЦР анализ у живущих половой жизнью и никогда не обследовавшихся, планирующих беременность, имевших незащищенные половые контакты, мазок сдают и женщины, и мужчины.

Полимеразная цепная реакция, именно так расшифровывается ПЦР, дает возможность в небольшом количестве взятого на анализ материала найти генетическую информацию инфекционного возбудителя. Самым распространенным является мазок методом ПЦР на ИППП (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы), кстати, эти же инфекции относятся к разряду «скрытых», не дающих явной симптоматики и не выявляющихся при обычных, рядовых исследованиях. Часто проводится диагностика герпетических инфекций, а также различных типов папилломавирусной инфекции

При этом особое внимание уделяется тем типам, которые вызывают рак шейки матки, то есть онкогенным

Мазок ПЦР на хламидии и другие инфекции берут у будущих мам, если те во время планирования ребенка его не сдавали. Данное исследование обязательно необходимо, так как скрытые инфекции, передающиеся половым путем, могут много лет «сидеть» в организме, никак себя не проявляя, но очень навредят будущему ребенку, могут привести к выкидышу, преждевременным родам, внутриутробной инфекции, а вследствие этого гибели плода. Конечно, лучше проводить лечение на этапе планирования ребенка, но если ПЦР диагностика инфекций их обнаружила уже после зачатия — не беда, есть современные безопасные препараты, которые можно принимать будущим мамам.

Многие женщины боятся сдавать анализы, наслушавшись и начитавшись о том, что любые манипуляции «там» врача могут спровоцировать выкидыш. А тем более нельзя сдавать мазок ПЦР при беременности, так как материал берется из шейки матки, а не с ее поверхности. Но это не страшно. Длина шейки матки немаленькая. Инструмент не попадет в матку, никак не затронет ребенка. И шейку расширять для взятия биоматериала не нужно. Мазок из цервикального канала безопасен для матери и ребенка и безболезненен.

Делается данное исследование не только с целью обнаружения инфекций, передающихся половым путем, но и возбудителей бактериального вагиноза и кандидоза — гарднерелл и грибов рода Кандида. Так что, расшифровка мазка на ПЦР диагностику бывает полезна и в таких «банальных» случаях.

Чтобы получить точный результат анализа, нужно соблюдать несколько простых правил перед его сдачей. Подготовка к мазку на ПЦР очень проста.

1. Нельзя мочиться за 3 часа до сдачи анализа.

2. Исследование проводится вне приема антибиотиков и антибактериальных средств.

3. Лучше сдавать мазок в середине цикла, но не перед самым началом менструации или сразу после завершения.

4. За 2-3 суток до исследования не использовать местных средств контрацепции и вагинальных препаратов.

5. В течение нескольких часов до сдачи мазка нельзя подмываться и спринцеваться.

6. Половую жизнь нужно прекратить минимум за 1,5 суток до взятия материала.

7. Сдачу мазка следует немного отложить, если накануне были взяты кольпоскопические пробы для выявления заболеваний шейки матки.

Расшифровка полученных результатов

Метод исследования ИФА строится на выявлении антигенов к разным вирусам. Новый микроорганизм, поселяющийся в человеке, получает от него ответ его иммунной системы. У каждого вида вируса свой антиген. Присутствие антигена LGG к вирусу говорит о том, что иммунитет к нему уже выработан, так как человек болел этой вирусной инфекцией раньше. Если есть антиген LGM, то вирус первый раз внедрился в организм, и идет процесс выработки иммунитета к этому вирусу. В острой фазе инфекции в крови присутствуют оба антигена.

Расшифровать результат исследования методом ПЦР может и не врач, если есть ДНК вируса, то есть и вирус. В некоторых случаях бывают и ошибки. Сам метод очень точный, ошибки могут быть возникнуть по вине медработников, которые делали забор крови.